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Genética Molecular de la Patogénesis Fúngica Genética Molecular de la Patogénesis Fúngica
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Biogénesis de la pared y regulación transcripcional de enzimas líticas
Responsable: M. Isabel González Roncero
Caracterización molecular del sistema lítico de F. oxysporum f.sp. lycopersici
 

Durante la patogénesis intervienen numerosas enzimas líticas de compuestos y polímeros vegetales, cuya producción requiere la activación de los genes estructurales responsables así como de factores de transcripción que responden a ciertos estímulos y que regulan la expresión de los anteriores. Hasta la fecha existen escasos ejemplos de mutantes fúngicos con un único gen interrumpido que muestren una pérdida total o parcial de la virulencia. Estos resultados se explican en parte por la redundancia funcional existente de los genes en cuestión, lo que aconseja la inactivación simultánea de reguladores generales que controlan la expresión coordinada de un conjunto de ellos. En el marco de la colaboración establecida con un grupo de la Universidad de Hamburgo (Alemania), realizamos un estudio comparativo extenso de las lipasas estructurales y de los factores de transcripción que regulan dicho sistema, en las especies Fusarium verticillioides, Fusarium oxysporum y Fusarium graminearum.

Por otra parte, las poligalacturonasas son las encargadas de despolimerizar la pectina, componente principal de la pared celular primaria de la planta. Entre ellas, las endopoligalacturonasas (endoPGs) han recibido mayor atención, debido a su inducción masiva por sustratos pécticos y a su capacidad para macerar tejidos de la planta. La búsqueda in silico  en el genoma de F. oxysporum f. sp. lycopersici ha revelado la existencia de al menos diez genes distintos responsables de otras tantas PGs, de los cuales cuatro determinan exoPGs y seis endoPGs (existiendo uno de ellos en cuatro copias localizadas en dos cromosomas dispensables). El perfil de expresión durante el proceso de infección de plantas de tomate revela la máxima inducción en dos genes, pg1 y pgx6, a tiempos cortos post-inoculación. Nuestro objetivo es identificar los mecanismos de regulación y modulación de la expresión de estos genes y su papel en los procesos de colonización y desarrollo de la marchitez vascular causada por F. oxysporum. Asimismo nos proponemos analizar la respuesta de defensa de la planta hospedadora Solanum lycopersicum, específicamente la inducción de genes responsables de Poligalacturonase Inhibiting Proteins (PGIP) en respuesta a la presencia /ausencia de distintas versiones (mutantes o silvestres) de las PGs de Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici
  Caracterización molecular del sistema lipolítico de F. oxysporum f.sp. lycopersici
Regulación de genes implicados en la biogénesis y remodelado de la pared celular durante el desarrollo
y la infección
 

La biogénesis y el remodelado de la pared celular implican numerosas rutas biosintéticas con la acción concertada de cientos de productos génicos, como sintasas de quitina, sintasas de glucano, glicosiltransferasas, glicosilhidrolasas, quitinasas y glucanasas. El entrecruzamiento entre glucano, quitina y proteínas está estrechamente relacionado con la plasticidad que la pared celular presenta durante los diferentes estadios del desarrollo en hongos filamentosos y por ende del proceso de infección. En el patógeno de arroz Magnaporthe grisea se ha identificado un factor de transcripción, Con7p, que regula procesos morfogenéticos relacionados con la patogénesis, controlando la expresión de genes que determinan proteínas asociadas a la pared celular como quitinasa, sintasa de quitina, proteínas de unión a quitina, ?-glucanasa o ?-1,3-glucanosil transferasa. En F. oxysporum hemos identificado tres genes ortólogos al con7 de M. grisea. Uno de ellos, denominado Focon7-1, existe en copia única, y los otros dos, Focon7-21 y Focon7-22, se localizan en una región genómica duplicada. Los mutantes deficientes ?con7-1  han resultado  ser no patógenos sobre plantas de tomate, mientras que los mutantes ?con7-2 presentan comportamiento patotípico igual al silvestre. Por otro lado, la transcripción del gen Focon7 -1 tiene lugar mediante un procesamiento diferencial de sus intrones, originando cuatro tipos de mRNA distintos y representados con distinta abundancia relativa en las condiciones del estudio.

 
OTRAS LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN
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Antonio Di Pietro
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