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YEAST SPECIES ASSOCIATED WITH HONEY: DIFFERENT IDENTIFICATION METHODS
ESPECIES DE LEVADURAS ASOCIADAS A LA MIEL: MéTODOS DIVERSOS DE IDENTIFICACIóN

Carvalho, C.M.1, Meirinho, S.1, Estevinho, M.L.F.1 and Choupina, A.1*

1Departamento de Biologia e Microbiologia. Escola Superior Agrária de Bragança (ESAB). Apartado 1172. 5301-855 Bragança. Portugal. *albracho@ipb.pt

Additional keywords
Honey yeast identification. 26S rDNA gene. 5.8S-ITS region. API 20C AUX. PCR-RFLP.
 
Palabras clave adicionales
Identificación levaduras de la miel. Gen 26S rDNA. Región 5.8S-ITS. API 20C AUX. PCR-RFLP.
 
SUMMARY
In the present study, three different methods were used to identify yeast isolated from Trás-os-Montes, Portuguese honey. A total of 24 isolates were identified using a partial sequence of the 26S rRNA gene (rDNA), restriction patterns generated from the region spanning the internal transcribed spacers (ITS1 and ITS2) of the 5.8S rRNA gene and the API 20C AUX kit. Nine different yeast species were identified representing six different genera. Among the isolated honey samples, Rhodotorula mucilaginosa, Candida magnoliae and Zygosaccharomyces mellis were the predominant species. Partial sequence of the 26S rDNA yielded the best results in terms of correct identification, followed by-5.8S-ITS analysis. The commercial identification kit API 20C AUX was able to correctly identify only 58% of the isolates. Two new 5.8S-ITS profiles were described, corresponding to Trichosporon mucoides and Candida sorbosivorans.
 
RESUMEN
En este estudio, se han utilizado tres métodos para identificar levaduras aisladas de la miel de Trás-os-Montes, Portugal. Se han identificado un total de 24 aislados usando una secuencia parcial del gen rRNA 26S (rDNA), los patrones de restricción generados de la región de los espaciadores transcritos internos (ITS1 e ITS2) del gen rRNA 5.8S (rDNA) y el kit API 20C AUX. Fueron identificadas nueve especies distintas de levaduras que representan seis géneros distintos. Entre las muestras aisladas de la miel, Rhodotorula mucilaginosa, Candida magnoliae y Zygosaccha-romyces mellis eran las especies predominantes. La secuencia parcial del rDNA 26S rindió los mejores resultados para la correcta identificación, seguida por el análisis del 5.8S-ITS. El kit comercial de identificación API 20C AUX. sólo identificó correctamente el 58% de los aislados. Se describen dos perfiles nuevos de 5.8S-ITS, correspondiendo a Trichosporon mucoides y Candida sorbosivorans.
 
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